FLAG 标签,或 FLAG 八肽,或 FLAG 表位,是一种多肽蛋白质标签,可以用重组 DNA 技术添加到蛋白质中,其序列图案为 DYKDDDDK(其中 D=天冬氨酸,Y=酪氨酸,K=赖氨酸)。它是最特异的标签之一,是一种通用种 属工抗原,已经开发出特异的、高亲和力的单克隆抗体,因此可用于亲和层析法的蛋白质纯化,也可用于定位活细胞内的蛋白质。它已被用于分离重组的、过量表达的蛋白和宿主生物体表达的野生型蛋白。它还可用于分离具有多个亚单位的蛋白质复合物,因为其温和的纯化过程往往不会破坏这种复合物。它已被用于获得足够纯度和质量的蛋白质,以通过 X 射线晶体学进行三维结构测定。FLAG 标签可用于许多需要抗体识别的不同检测中。如果没有针对某一特定蛋白的抗体,在蛋白上添加 FLAG 标记,就可以用针对 FLAG序列的抗体来研究该蛋白。例如通过免疫荧光、免疫沉淀或通过 SDS PAGE蛋白电泳和 Western 印迹检测进行细胞定位研究。从 N 端到 C 端的 FLAG标签的肽序列是。DYKDDDDK(1012Da)。此外,它还可以串联使用,常见的是 3xFLAG 肽。DYKDHD-G-DYKDHD-I-DYKDDDDK(最后一个标签编码一个肠激酶裂解位点)。它可以与蛋白质的 C 端或 N 端融合,或插入到蛋白质内。一些市售的抗体(如 M1/4E11)只有在 N 端出现时才能识别该表位。然而,其他可用的抗体(如 M2)则对位置不敏感。FLAG标签中的酪氨酸残基可以被硫酸化,这可能会影响抗体对 FLAG 表位的识别。FLAG 标签可以与其他亲和力标签一起使用,例如多组氨酸标签(His 标签)、HA标签或 myc 标签。